Оценка эффективности применения активированной глицирризиновой кислоты у пациенток с ВПЧ-ассоциированными поражениями шейки матки с учетом уровня половых стероидных и гонадотропных пептидных гормонов.

Резюме

Введение: Персистенция папилломавирусной инфекции (ПВИ) с экспрессией генов онкобелков вызывает изменения многослойного плоского эпителия, что является непосредственной причиной развития рака шейки матки. Патогенетически обосновано применение препарата активированной глицирризиновой кислоты при ВПЧ-ассоциированных поражениях шейки матки. В экспериментальном исследовании на культуре клеток аденокарциномы шейки матки линии Hela было показано, что антипролиферативное действие глицирризиновой кислоты усиливается низкими концентрациями эстрадиола и ослабляется тестостероном.

Цель исследования: оценка эффективности препарата активированной глицирризиновой кислоты (Эпиген Интим, спрей 0,1%) у пациенток с ВПЧ-ассоциированной патологией шейки матки с учетом уровня половых стероидных и гонадотропных пептидных гормонов.

Материалы и методы: проведено проспективное исследование с участием 51 пациентки с ВПЧ-ассоциированной патологией шейки матки (ASCUS (атипические клетки плоского эпителия неясного значения), LSIL (плоскоклеточное интраэпителиальные поражение низкой степени), HSIL (плоскоклеточное интраэпителиальные поражение высокой степени) по классификации Бетесда) и отсутствием клинических и/или лабораторных признаков гиперандрогении. Проводилось клиническое, кольпоскопическое, микроскопическое, цитогистологическое и иммуноцитохимическое исследование, оценка гормонального статуса. Все пациентки получали препарат Эпиген Интим спрей 0,1% 3 раза в день в течение 30 дней с момента включения в исследование. При наличии показаний выполнялась конизация шейки матки. Оценка эффективности лечения проводилась через 90±7 дней после начала терапии на основании динамики результатов исследования ВПЧ-ПАП-тест жидкостный с определением коэкспрессии онкобелков p16/Ki67. Дополнительно оценивалась динамика кольпоскопической картины.

Результаты исследования: при оценке уровня половых стероидных и гонадотропных пептидных гормонов у пациенток с ВПЧ-ассоциированными поражениями шейки матки было установлено, что уровень эстрадиола у пациенток с HSIL ниже по сравнению с пациентками с ASCUS и LSIL (32 (32,0; 36,0) пг/мл против 40,0 (34,5; 45,5) и 40,0 (33,0; 44,0) пг/мл, соответственно). Через 90 дней от начала наблюдения по результатам цитологического исследования эпителия шейки матки у 50/51 (98,0%) пациенток установлено отсутствие интраэпителиального поражения шейки матки (NILM) с отсутствием коэкспрессии онкобелков p16/Ki67, у 48/51 (94,1%) пациенток не выявлено ДНК ВПЧ-ВР, кольпоскопические признаки, ассоциированные с ПВИ (аногенитальные кондиломы, признаки хронического цервицита) сохранялись лишь у 6/51 (11,8%) пациенток.

Заключение: применение препарата активированной глицирризиновой кислоты у пациенток репродуктивного возраста с ВПЧ-ассоциированными поражениями шейки матки без клинических и/или лабораторных признаков гиперандрогении позволило достичь высоких показателей эффективности: 98,5% по результатам цитологического исследования, 83,3% в отношении снижения вирусной нагрузки ВПЧ-ВР, 85,7% – в отношении коэкспрессии онкобелков р16/Ki67.

Введение

Вирус папилломы человека (ВПЧ) является возбудителем одной из наиболее распространенной инфекции, передаваемой половым путем, среди молодых женщин. Персистенция папилломавирусной инфекции (ПВИ) с экспрессией генов онкобелков вызывает изменения многослойного плоского эпителия, что является непосредственной причиной развития рака шейки матки, а также некоторых видов рака влагалища и вульвы, ануса, головы и шеи.¹

Распространенность рака шейки матки в 2020 году в мире составила 604 127 случаев, став причиной 341 831 смертей, стандартизованная по возрасту заболеваемость составила 13,3 случаев на 100 000 женщин, смертность – 7,2 случаев на 100 000 женщин.² В России в структуре злокачественных новообразований рак шейки матки составляет 4,6%.³

Изменения шейки матки, индуцируемые персистенцией ПВИ, возникают в переходной зоне, области стыка многослойного плоского и цилиндрического эпителия. При плоскоклеточном интраэпителиальном поражении низкой степени (LSIL) отмечается активная репликация ВПЧ при незначительных изменениях эпителиальных клеток, в случае же плоскоклеточного интраэпителиального поражения высокой степени (HSIL) интенсивность репликации ВПЧ снижается, повышается экспрессия генов онкобелков ВПЧ (E6/E7), что сопровождается нарушением клеточного цикла и процессов пролиферации, дифференцировки и апоптоза инфицированных клеток.^4,5

Длительной персистенции ПВИ способствует локальная иммуносупрессия, вызываемая ВПЧ. Так, ВПЧ оказывает влияние на паттерн-распознающие рецепторы (PRR) антигенпрезентирующих клеток и связанные с ними пути передачи сигнала, нарушая распознавание вируса иммунной системой и ингибируя синтез интерферона.⁶ Онкобелок Е5 может напрямую подавлять передачу сигнала от рецепторов интерферона в ядра инфицированных клеток. Кроме того, ВПЧ влияет на миграцию, созревание и дифференцировку дендритных клеток – онкобелок Е2 препятствует их миграции, а Е6 – их функционированию. Персистенции ПВИ также способствует нарушение ответа Т-хелперов с последующим истощением субпопуляции CD8+ Т-лимфоцитов.^7-10

Онкобелки E6/E7 повышают экспрессию интерлейкина-6 (ИЛ-6) в кератиноцитах, подавляя экспрессию белка р53 – естественного супрессора промотера ИЛ-6, способствуя развитию воспалительной реакции и прогрессии плоскоклеточного интраэпителиального поражения. Онкобелки Е5, Е6 и Е7 способны активировать сигнальные пути транскрипционного фактора κB (NF-κB), повышая активность циклооксигеназы-2 (ЦОГ-2) и поддерживая хроническое воспаление. Кроме того, онкобелки ВПЧ активируют транскрипционный фактор АР-1 (активирующий протеин-1), участвующий в гиперпродукции ЦОГ-2. Данный процесс сопровождается продукцией простагландина Е2, который оказывает потенциально неблагоприятные эффекты на эпителий шейки матки – стимулирует пролиферацию, ангиогенез и ингибирует апоптоз.^11,12 Хроническое воспаление ассоциировано с повышением уровня оксида азота (NO) и индуцируемой синтазы NO. Показано, что в клетках, инфицированных ВПЧ, NO может вызывать повреждения ДНК и снижение уровня экспрессии генов белков-супрессоров опухолевого роста р53 и pRb (белок ретинобластомы).¹³ Следовательно, помимо хронического воспаления, в прогрессировании плоскоклеточного поражения при ПВИ может играть роль оксидативный стресс (ОС).

Во-первых, онкобелки ВПЧ индуцируют ОС, вызывающий перекисное окисление липидов и повреждение клеток. Во-вторых, ОС, вызванный экзогенными факторами (курение, ИППП ко-инфекция) облегчает интеграцию вирусного генома в геном хозяина – активные формы кислорода (АФК) наряду с NO вызывают двуцепочечные разрывы ДНК хозяина, обеспечивая тем самым сайты интеграции вирусного генома.¹⁴ В дальнейшем онкобелки Е6 и Е7 поддерживают образование активных форм кислорода и азота путем активации НАДФН-оксидазы, стимулируя транслокацию регуляторных субъединиц НАДФН-оксидазы к мембране клеток с формированием активных комплексов.¹⁵ Накопление индуцированных НАДФН-оксидазной активностью повреждений ДНК приводит к формированию мультимерных комплексов (инфламмасом) и еще большему повышению уровня провоспалительных цитокинов (ИЛ-1β, ИЛ-1α, ИЛ-18), которые способствуют формированию хромосомных аберраций и эпигенетических изменений ДНК, приводящих к злокачественной трансформации клеток.¹⁶

Учитывая патогенетические особенности прогрессирования ВПЧ-ассоциированных плоскоклеточных интраэпителиальных поражений шейки матки, а именно локальную иммуносупрессию, провоспалительное микроокружение и оксидативный стресс перспективным может быть применение глицирризиновой кислоты (ГК, Эпиген Интим, спрей 0,1%) при ВПЧ-ассоциированной патологии шейки матки, так как этот препарат обладает противовирусным, противовоспалительным и иммуностимулирующим действием.

Внутриклеточно противовирусное действие ГК реализуется путем ее ингибирующего действия в отношении протеинкиназы С и казеинкиназы II, участвующих в фосфорилировании вирусных белков.¹⁷ На уровне транскрипции ГК способна ингибировать транскрипционные факторы АР-1 и NF-κB, а на уровне трансляции – снижать уровень экспрессии неструктурного вирусного белка Nsp2, препятствуя не только репликации вирусов, но и сборке готовых вирусных частиц.¹⁸

Иммуностимулирующее действие ГК проявляется повышением числа и активности Т-лимфоцитов, повышением уровня экспрессии маркеров созревания дендритных клеток, повышением синтеза γ-ИФН, ИЛ-4 и ИЛ-2, недостаток которых отмечается при папилломавирусной инфекции. ГК стимулирует иммунный ответ Тh-1 типа, дисфункция которого отмечается при персистенции папилломавирусной инфекции.^19,20

Противовоспалительное действие ГК сопряжено с антиоксидантным действием и характеризуется подавлением продукции фактора некроза опухоли-ά (ФНО- ά), провоспалительных цитокинов (ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-17).¹⁸ ГК ингибирует деградацию ингибитора κB (IκB) и последующую транслокацию транскрипционного фактора κB в ядро, в результате угнетается синтез провоспалительных цитокинов и молекул межклеточной адгезии.²¹ ГК ингибирует сигнальные пути, участвующие в воспалительной реакции (MAPK/ERK).¹² ГК способна блокировать ЦОГ-2, тем самым снижая синтез простагландина E2, а также ингибировать воспаление, опосредованное амфотерином.²² ГК активирует сигнальный путь редокс-чувствительного фактора транскрипции Nrf2 через связывание с активным центром белка Keap1, что приводит к снижению внутриклеточного уровня активных форм кислорода.¹⁸

Антипролиферативное действие ГК опосредуется снижением экспрессии генов белков, ответственных за инициацию деления клеток (циклин-зависимой киназы 4, циклина D1), повышением экспрессии белка р21, ингибирующего клеточный цикл, и белка супрессора опухолевого роста р53, что приводит к остановке клеточного цикла избыточно пролиферирующих клеток.²³ В экспериментальном исследовании на культуре клеток аденокарциномы шейки матки линии Hela было показано, что антипролиферативное действие ГК усиливается эстрадиолом (1 мкМ) и ослабляется тестостероном (в концентрации 1 мкМ и 10 мкМ).²⁴ У женщин репродуктивного возраста (фолликулярная фаза менструального цикла) концентрации эстрадиола в сыворотке крови равны 228 – 400 пмоль/л, свободного тестостерона – 0,5-2,5 нмоль/л, при этом в зоне трансформации многослойного плоского эпителия шейки матки отмечается высокая экспрессия генов рецепторов стероидных гормонов.^25-26 На основании полученных данных можно предположить, что наибольшую эффективность от применения препарата глицирризиновой кислоты следует ожидать у женщин репродуктивного возраста при нормальных уровнях половых стероидных гормонов, а у пациенток с гиперандрогенными состояниями эффект может быть менее выраженным.

Целью данного исследования являлась оценка эффективности препарата активированной глицирризиновой кислоты (Эпиген Интим, спрей 0,1%) у пациенток с ВПЧ-ассоциированной патологией шейки матки, у которых также определяли уровень половых стероидных и гонадотропных пептидных гормонов.

Материалы и методы

Дизайн исследования: проспективное наблюдательное исследование с участием 51 пациентки с ВПЧ-ассоциированной патологией шейки матки (ASCUS, LSIL, HSIL по классификации Бетесда). База проведения исследования: ГКБ № 1 имени Н. И. Пирогова, гинекологическое отделение.

Критерии включения в исследование: женщины от 18 до 45 лет включительно, наличие ВПЧ-ассоциированной патологии шейки матки согласно цитологическому заключению (ASCUS, LSIL, HSIL по классификации Бетесда), отсутствие вакцинации против вируса папилломы человека в анамнезе, отсутствие клинических признаков гиперандрогении (вирилизация, андрогензависимая дермопатия (акне, гирсутизм, алопеция), желание пациентки участвовать в исследовании и наличие информированного письменного согласия.

Критерии невключения в исследование: известная непереносимость препарата Эпиген Интим, спрей 0,1%, клинические и/или лабораторные признаки гиперандрогении (вирилизация, андрогензависимая дермопатия (акне, гирсутизм, алопеция), уровень общего тестостерона свыше 1,72 нммоль/л), тяжелые сопутствующие заболевания, делающие невозможным выполнение процедур протокола, злокачественные новообразования внутренних и наружных половых органов на момент исследования и в период 5 лет до начала исследования в анамнезе, участие в других клинических исследованиях в течение 3 месяцев до включения в исследование, неспособность следовать процедурам протокола исследования, а также любые другие сопутствующие медицинские или серьезные психические состояния, которые делают пациентку непригодной для участия в исследовании или ограничивают правомерность получения информированного согласия.

Критерии преждевременного завершения исследования: появление у пациентки вышеперечисленных критериев невключения во время проведения исследования, желание пациентки прекратить участие в исследовании, медицинские показания (например, хирургическая операция), отмена препарата Эпиген Интим спрей 0,1% лечащим врачом (с указанием причины отмены), выявленная в ходе исследования некомплаентность, нарушение пациенткой протокола исследования.

Обследование женщин включало сбор анамнеза, гинекологический осмотр, кольпоскопическое исследование, микроскопические исследование вагинального отделяемого, цитологическое исследование эпителия шейки матки, ВПЧ-ПАП-тест жидкостный с определением коэкспрессии онкобелков p16/Ki67, гистологическое исследование препарата шейки матки по показаниям, оценка гормонального статуса (уровень ЛГ, ФСГ, эстрадиола, прогестерона, тестостерона общего в сыворотке крови) однократно на 2-4 день менструального цикла.

При проведении кольпоскопического исследования использовался кольпоскоп Karl Kaps GmbH & Co, Germany с 7–15–30-кратным увеличением. Слизистую шейки матки исследовали как без обработки, так и с последующим нанесением 3% раствора уксусной кислоты и затем 2% водного раствора Люголя (проба Шиллера). При выполнении кольпоскопии намечались участки для прицельного взятия последующей биопсии при наличии показаний. Кольпоскопическое заключение формулировалось в соответствии с Международной классификацией кольпоскопических терминов, одобренной IFCPC (International Federation of Cervical Pathology and Colposcopy – Международная федерация патологии шейки матки и кольпоскопии).

Взятие материала для исследования ВПЧ-ПАП-тест жидкостный с определением коэкспрессии онкобелков p16/Ki67 выполнялся цитощёткой Rovers Cervex-Brush Combi в контейнер с транспортной средой для жидкостной цитологии. Исследование выполнялось на базе ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора. Результаты цитологического исследования оценивались согласно системе Бетесда (2014).

Все пациентки получали препарат Эпиген Интим спрей 0,1% 3 раза в день в течение 30 дней с момента включения в исследование. При наличии показаний (HSIL / цервикальная интраэпителиальная неоплазия III степени) выполнялась конизация шейки матки. Оценка эффективности лечения проводилась через 90±7 дней после начала терапии на основании динамики результатов исследования ВПЧ-ПАП-тест жидкостный с определением коэкспрессии онкобелков p16/Ki67. Дополнительно оценивалась динамика кольпоскопической картины. Контроль безопасности и переносимости препарата проводился на протяжении всего периода его использования.

Этические нормы и правила. Исследование выполнено в соответствии с принципами Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы научных и медицинских исследований с участием человека», правилами надлежащей клинической практики (ICH GCP), действующими порядками и стандартами оказания медицинской помощи и другими применимыми регуляторными требованиями к проведению клинических исследований и наблюдательных программ в Российской Федерации. Исследование одобрено Локальным этическим комитетом ФГБОУ ВО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России (Протокол №214 от 24 января 2022 г.). Пациентки, включенные в исследование, подписали информированное согласие на участие в исследовании до начала любых процедур, связанных с исследованием.

Статистический анализ

Статистический анализ проводился с использованием методов параметрического и непараметрического анализа. Накопление, корректировка, систематизация исходной информации и визуализация полученных результатов осуществлялись в электронных таблицах Microsoft Office Excel 2016. Статистический анализ проводился с использованием программы IBM SPSS Statistics v.26 (разработчик - IBM Corporation).

Категориальные данные описывались с указанием абсолютных значений и процентных долей.

Гипотеза о нормальности распределения проверялась по одновыборочному критерию Колмогорова-Смирнова. В случае нормального распределения количественные данные описывались с помощью среднего значения (n) и стандартного отклонения (СО). В случае отсутствия нормального распределения количественные данные описывались с помощью медианы (Me) и нижнего и верхнего квартилей (Q1 – Q3).

При сравнении количественных показателей, распределение которых отличалось от нормального, в двух связанных группах, использовался критерий Уилкоксона. Сравнение бинарных показателей, характеризующих две связанные совокупности, выполнялось с помощью теста МакНемара.

Различия считались статистически значимыми при p < 0,05.

Результаты и обсуждение

В исследование включена 51 пациентка. Медиана возраста составила 36 (30; 39) лет. Медиана индекса массы тела составила 22,31 (20,32; 24,24) кг/м2. Гормональный статус на момент включения в исследование: медиана эстрадиола 38 (33; 44) пг/мл, ЛГ 4,6 (4,2; 4,8) мМЕ/мл, ФСГ 4,8 (4,6; 5,2) мМЕ/мл, тестостерона общего 0,8 (0,6; 0,8) нмоль/л, средний уровень прогестерона 1,3 (±0,5) нмоль/л, что соответствовало нормальным уровням половых стероидных гормонов у женщин с учетом возраста и фазы менструального цикла. Уровни половых стероидных и гонадотропных пептидных гормонов в подгруппах пациенток в зависимости от результатов цитологического заключения представлены в Таблице.

Согласно результатам цитологического исследования эпителия шейки матки у 12/51 (23,5%) пациенток получен ASCUS, у 32/51 (62,8%) – LSIL, у 7/51 (13,7%) – HSIL. У 18/51 (35,3%) пациенток отмечена высокая/клинически значимая вирусная нагрузка ВПЧ-ВР. У 7/51 (13,7%) пациенток обнаружено 2 и более штамма ВПЧ. Коэкспрессия онкобелков p16/Ki67 обнаружена у 7/51 (13,7%) пациенток. Гистологическое подтверждение тяжелой дисплазии (CIN III) получено в 5 случаях их 7 (71,4%).

По результатам микроскопического исследования вагинального отделяемого у 7/51 (13,7%) пациенток обнаружены признаки кандидозного вульвовагинита, у 6/51 (11,8%) пациенток признаки бактериального вагиноза, у остальных 38/51 (74,5%) пациенток патологии не выявлено.

По результатам кольпоскопического заключения сопутствующий кондиломатоз шейки матки, влагалища и/или вульвы установлен у 18/51 (35,3%) пациенток, признаки хронического цервицита – у 30/51 (58,8%) пациенток, эктопия/эктропион – у 22/51 (43,1%) пациенток, лейкоплакия шейки матки и/или вульвы – у 32/51 (62,7%) пациенток.

Через 90 дней от начала наблюдения по результатам цитологического исследования эпителия шейки матки у 50/51 (98,0%) пациенток установлено отсутствие интраэпителиального поражения шейки матки (NILM) с отсутствием коэкспрессии онкобелков p16/Ki67, у 1/51 (2,0%) пациентки – LSIL с коэкспрессией онкобелков p16/Ki67 на фоне снижения вирусной нагрузки (Рисунок 1,2). Данной пациентке рекомендована конизация шейки матки.

У 48/51 (94,1%) пациенток не выявлено ДНК ВПЧ-ВР, у 1/51 (2,0%) сохранялась высокая вирусная нагрузка, у 2/51 (3,9%) пациенток сохранялась клинически значимая вирусная нагрузка (p < 0,001) (Рисунок 2).

По результатам кольпоскопического заключения сопутствующий кондиломатоз НПО обнаружен у 1/51 (2,0%) пациентки, признаки хронического цервицита – у 5/51 (9,8%) пациенток (p < 0,001) (Рисунок 3).

Таким образом, было установлено, что уровень эстрадиола в подгруппе HSIL был ниже по сравнению с подгруппами ASCUS и LSIL, что может указывать, на то, что более низкий уровень эстрадиола может коррелировать с тяжестью плоскоклеточного интраэпителиального поражения шейки матки. Для уточнения данный гипотезы необходимы дальнейшие исследования.

В связи с ранее полученными экспериментальными данным в отношении влияния уровня половых стероидных гормонов на антипролиферативное действие ГК,²⁴ в данное исследование не включались пациенты с клиническими и/или лабораторными признаками гиперандрогении. Данный подход может обуславливать достигнутую высокую клиническую эффективность лечения ВПЧ-ассоциированной патологии шейки матки: эффективность по результатам цитологического исследования составила 98,5%, эффективность в отношении снижения вирусной нагрузки ВПЧ-ВР – 83,3%, в отношении коэкспрессии онкобелков р16/Ki67 (в сочетании с конизацией шейки матки при наличии показаний) – 85,7%.

В проведенных ранее исследованиях без учета гормонального статуса пациенток эффективность применения препарата Эпиген Интим, спрей 0,1% при ВПЧ-ассоциированной патологии шейки матки составила по результатам цитологического исследования 62,5% - 93,3%, в отношении снижения вирусной нагрузки ВПЧ-ВР – 46,7 – 88%.^27-29

Оценка влияния препарата активированной глицирризиновой кислоты на уровень коэкспрессии онкобелков р16/Ki67 выполнено впервые. Патогенетическим обоснованием данного эксперимента послужило продемонстрированное в ранее проведенных исследованиях изменение на уровне протеома, липидома и оксидативного статуса цервикальной зоны.^27,28,30 Так, на фоне применения активированной глицирризиновой кислоты методом электронного парамагнитного резонанса выявлено значимое снижение интенсивности сигналов пероксидрадикалов (LOO-), супероксидрадикалы (О2-) при одновременном повышении активности кислой фосфатазы на 54,4±5,9% (p<0,01), миелопероксидазы на 63,9±6,4% (р<0,01) и неспецифической эстеразы более чем в 2 раза (p<0,001).²⁷ На уровне протеома цервико-вагинальной жидкости применение активированной глицирризиновой кислоты привело к снижению уровня провоспалительных белков (компонента C3 системы комплимента, альфа-1-кислотного гликопротеина 1, богатого лейцином альфа-2-гликопротеина, протеинкиназы М-дзета, альфа-1-антитрипсина), увеличению уровня белков, участвующих в иммунном ответе (тиредоксина, протектина, эластазы нейтрофилов).²⁸ На уровне липидома цервико-вагинальной жидкости на фоне применения активированной глицирризиновой кислоты выявлены изменения в метаболизме сфинголипидов, глицерофосфолипидов и церамидов, что ассоциировано с улучшением цитологической картины.³⁰

Заключение

При оценке уровня половых стероидных и гонадотропных пептидных гормонов у пациенток с ВПЧ-ассоциированными поражениями шейки матки было установлено, что уровень эстрадиола у пациенток с HSIL ниже по сравнению с пациентками с ASCUS и LSIL (32 (32,0; 36,0) пг/мл против 40,0 (34,5; 45,5) и 40,0 (33,0; 44,0) пг/мл, соответственно).

Применение препарата активированной глицирризиновой кислоты у пациенток репродуктивного возраста с ВПЧ-ассоциированными поражениями шейки матки без клинических и/или лабораторных признаков гиперандрогении позволило достичь высоких показателей эффективности: эффективность по результатам цитологического исследования составила 98,5%, эффективность в отношении снижения вирусной нагрузки ВПЧ-ВР – 83,3%, в отношении коэкспрессии онкобелков р16/Ki67 – 85,7%.

Литература

• Роговская С.И. Папилломавирусная инфекция у женщин и патология шейки матки: (руководство практикующего врача). М.: ГЭОТАР-Медиа; 2015. [Rogovskaya S.I. Papillomavirus infection in women and cervical pathology: (practitioner's guide). M.: GEOTAR-Media; 2015 (in Russ.)].
• Singh D., Vignat J., Lorenzoni V. et al. Global estimates of incidence and mortality of cervical cancer in 2020: a baseline analysis of the WHO Global Cervical Cancer Elimination Initiative. Lancet Glob Health. 2023;11(2):197-206.
• Каприн А.Д., Старинский В.В., Шахзадова А.О. Состояние онкологической помощи населению России в 2022 году. М.: МНИОИ им. П.А. Герцена Минздрава России; 2022 [Kaprin A.D., Starinsky V.V., Shakhzadova A.O. The state of oncological care in Russia in 2022. M.: Moscow Scientific Research Institute of Oncology named after P.A. Herzen, the Ministry of Health of Russia; 2022 (in Russ.)].
• Li T.Y., Wu Z.N., Jiang M.Y. et al. Association between high risk human papillomavirus DNA load and cervical lesions in different infection status. Chinese journal of oncology. 2018;40(6):475-480.
• Okunade K.S. Human papillomavirus and cervical cancer. J Obstet Gynaecol. 2020;40(5):602-608.
• Luo X., Donnelly C.R., Gong W. et al. HPV16 drives cancer immune escape via NLRX1-mediated degradation of STING. J Clin Invest. 2020;130(4):1635-1652.
• Raikhy G., Woodby B.L., Scott M.L. et al. Suppression of stromal interferon signaling by human papillomavirus 16. J Virol. 2019;93(19):e00458-e519.
• Huang J., Diao G., Zhang Q. et al. E6‑regulated overproduction of prostaglandin E2 may inhibit migration of dendritic cells in human papillomavirus 16‑positive cervical lesions. Int J Oncol. 2020;56(4):921-931.
• Manzo-Merino J., Lagunas-Martinez A., Contreras-Ochoa C.O. et al. The human papillomavirus (HPV) E6 oncoprotein regulates CD40 expression via the AT-hook transcription factor AKNA. Cancers Basel. 2018;10(12):521.
• Vattai A., Kremer N., Meister S. et al. Role of FoxP3-positive regulatory T-cells in regressive and progressive cervical dysplasia. J Cancer Res Clin Oncol. 2022;148(2):377-386.
• Artaza-Irigaray C., Molina-Pineda A., Aguilar-Lemarroy A. et al. E6/E7 and E6(*) from HPV16 and HPV18 upregulate IL-6 expression independently of p53 in keratinocytes. Front Immunol. 2019;10:1676.
• Zeng L., Zhen Y., Chen Y. et al. Naringin inhibits growth and induces apoptosis by a mechanism dependent on reduced activation of NF-κB/COX-2-caspase-1 pathway in HeLa cervical cancer cells. Int J Oncol 2014;45(5):1929–1936.
• Wei L., Gravitt P.E., Song H. et al. Nitric oxide induces early viral transcription coincident with increased DNA damage and mutation rates in human papillomavirus-infected cells. Cancer Res. 2009;69(11):4878–4884.
• Chen W.Y., Filippova M., Williams V.M. et al. Chronic oxidative stress increases the integration frequency of foreign DNA and human papillomavirus 16 in human keratinocytes. Am J Cancer Res. 2016;6(4):764-780.
• Marullo R., Werner E., Zhang H. et al. HPV16 E6 and E7 proteins induce a chronic oxidative stress response via NOX2 that causes genomic instability and increased susceptibility to DNA damage in head and neck cancer cells. Carcinogenesis. 2015;36(11):1397–1406.
• Kgatle M.M., Spearman C.W., Kalla A.A. et al. DNA oncogenic virus-induced oxidative stress, genomic damage, and aberrant epigenetic alterations. Oxid Med Cell Longev. 2017;1:1-16.
• Cinatl J., Morgenstern B., Bauer G. et al. Glycyrrhizin, an active component of liquorice roots, and replication of SARS-associated coronavirus. The Lancet. 2003;361(9374):2045-2046.
• Nascimento M., De Araujo D. Exploring the pharmacological potential of glycyrrhizic acid: from therapeutic applications to trends in nanomedicine. Future Pharmacology. 2022;2(1):1-15.
• Bordbar N., Karimi M.H., Amirghofran Z. The effect of glycyrrhizin on maturation and T cell stimulating activity of dendritic cells. Cell. Immunol. 2012;280(1):44-49.
• Ayeka P.A., Bian Y., Githaiga P.M. et al. The immunomodulatory activities of licorice polysaccharides (Glycyrrhiza uralensis Fisch.) in CT 26 tumor-bearing mice. BMC Complement Altern Med. 2017;17(1):536.
• Chang Y.L., Chen C.L., Kuo C.L. et al. Glycyrrhetinic acid inhibits ICAM-1 expression via blocking JNK and NF-kappaB pathways in TNF-alpha-activated endothelial cells. Acta Pharmacol. Sin. 2010;31(5):546-553.
• Richard A.S., Exploring the Pivotal Immunomodulatory and Anti-Inflammatory Potentials of Glycyrrhizic and Glycyrrhetinic Acids. Mediators of Inflammation. 2021:6699560.
• Saeed M. Antiproliferative and apoptotic potential of Glycyrrhizin against HPV16+ Caski cervical cancer cells: A plausible association with downreguation of HPV E6 and E7 oncogenes and Notch signaling pathwayJournal of Pharmaceutical Research International. 2020;32(25):52 – 66.
• Филимонова М.С., Шимановский Н.Л. Влияние глицирризиновой кислоты на жизнеспособность клеток аденокарциномы шейки матки линии HeLa при разных концентрациях половых стероидных гормонов. Химико-фармацевтический журнал. 2024;58(1):3-9 [Filimonova M.S., Shimanovsky N.L. The effect of glycyrrhizic acid on the viability of HeLa cervical adenocarcinoma cells at different concentrations of sex steroid hormones. Chemical and Pharmaceutical Journal. 2024;58(1):3-9 (in Russ.)].
• Савельева Г.М., Сухих Г.Т., Манухин И.Б. Гинекология. Национальное руководство. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013. [Savelieva G.M., Sukhih G.T., Manukhin I.B. Gynecology. National guideline). M.: GEOTAR-Media; 2013 (in Russ.)].
• Remoue F., Jacobs N., Miot V. et al. High intraepithelial expression of estrogen and progesterone receptors in the transformation zone of the uterine cervix. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 2003;189(6):1660-1665.
• Боровиков И.О., Куценко И.И., Горринг Х.И. и др. Низкая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения шейки матки: терапевтические и патогенетические возможности активированной глицирризиновой кислоты. РМЖ. Мать и дитя. 2019;2:1–5 [Borovikov I.O., Kutsenko I.I., Gorring H.I. et al. Low-grade squamous intraepithelial lesion: therapeutic and pathogenic properties of activated glycyrrhizinic acid. Russian Journal of Woman and Child Health. 2019;2:1–5 (in Russ.)].
• Франкевич В.Е., Назарова Н.М., Довлетханова Э.Р. и др. Протеомный анализ цервиковагинальной жидкости при применении активированной глицирризиновой кислоты у пациенток с ВПЧ-ассоциированными поражениями шейки матки. Акушерство и гинекология. 2022;5:109-117 [Frankevich V.E., Nazarova N.M., Dovletkhanova E.R. et al. Proteomic analysis of cervicovaginal fluid of patients with HPV-associated cervical lesions treated with activated glycyrrhizic acid. Obstetrics and gynecology. 2022;5:109-117 (in Russ.)].
• Рахматулина М.Р., Большенко Н.В., Липова Е.В. Опыт применения активированной глицирризиновой кислоты при вульвовагинитах, цервицитах и генитальной папилломавирусной инфекции. Акушерство и гинекология. 2019;9:153-158 [Rakhmatullina M.R., Bolshenko N.V., Lipova E.V. Experience of application of activated glycyrrhizic acid in vulvovaginitis, cervicitis and genital papillomavirus infection. Obstetrics and gynecology. 2019;9:153-158 (in Russ.)].
• Стародубцева Н.Л., Чаговец В.В., Назарова Н.М. и др. Изменение липидома эпителия шейки матки при ВПЧ-ассоциированных поражениях. Медицинский оппонент. 2022;4(18):28–35 [Starodubtseva N.L., Chagovets V.V., Nazarova N.M. et al. Changes in cervical epithelial lipid composition in HPV-associated lesions. Medical opponent. 2022;4(18):28-35 (in Russ.)].

Таблица. Уровни половых стероидных и гонадотропных пептидных гормонов в подгруппах пациенток в зависимости от результатов цитологического заключения. Данные представлены в виде медианы (Me) и нижнего и верхнего квартилей (Q1 – Q3).

Рисунок 1. Динамика результатов цитологического исследования на фоне применения спрея Эпиген Интим.

Рисунок 2. Динамика вирусной нагрузки ВПЧ-ВР и коэкспрессии онкобелков p16/Ki67 на фоне применения спрея Эпиген Интим.

*p < 0,001, ** p = 0,009

Рисунок 3. Динамика кольпоскопической картины на фоне применения спрея Эпиген Интим.

* р < 0,001